ELISA試劑盒該怎么選擇，掌握這五個步驟

更新時間：2020-08-20

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　　ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用，然而實驗新手們面對各種各樣、動則上上千種的ELISA試劑盒，內心應該是崩潰的。

　　首先，你要明確研究種屬：

　　一般來說，廠家都會在產品名稱上標明種屬，且為單詞，檢索種屬的常用語言為英文。

　　如果您需對不同物種的同一因子進行定量，建議優先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒。

　　其次，要明確樣本類型：

　　不同廠家驗證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本，根據樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購買前需仔細核對。

　　第三步：要會預測自己的目標因子的濃度

　　一般來說，待測因子可以根據經驗或資料獲得參考的檢測范圍，且正常人與疾病狀態存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會顯著增高，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。

　　因而，必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。

　　若濃度太低，可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測動態范圍更寬的化學發光法ELISA試劑盒。

　　如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒，各類型檢測范圍差異較大，需要根據實際情況選擇合適的試劑盒。

　　第四步：檢查試劑盒進行過哪些質控

　　質控數據在說明書中即可找到，在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質控實驗，包括批次內(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試等，每個數據好都看一下，確保*的結果重現性及準確性。

　　第五步：確定需檢測的因子數量

　　如果待測因子超過 5 個，且樣本量較小時，單因子 ELISA 檢測方法并不是選擇。

　　建議考慮多因子檢測方法，如固相芯片(樣本數量一般 5 個以內，檢測指標可達上百個)及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個，檢測指標多達 50 個)或微流控 ELISA 檢測系統 Ella。

　　可節約樣本及時間成本，也可保證檢測結果準確。

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